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            BUNSEN本生:ELISA實(shí)驗(yàn)疑難問(wèn)題解答

            更新時(shí)間:2023-11-29    點(diǎn)擊次數(shù):1907
              BUNSEN本生:ELISA實(shí)驗(yàn)疑難問(wèn)題解答
             
              ELISA實(shí)驗(yàn)做了很多次,可是結(jié)果還是有偏差?可能很多同學(xué)都會(huì)出現(xiàn)這樣的問(wèn)題,那么問(wèn)題到底出在哪呢,今天BUNSEN本生小編就來(lái)給大家總結(jié)一下,ELISA實(shí)驗(yàn)中會(huì)經(jīng)常遇見(jiàn)的問(wèn)題。
             
              1.非正常的樣本值
             
              ①不正確的收集或保存
             
              解決方案:確保正確的底物體積混合。如果底物是凍干粉,用相應(yīng)緩沖液重懸*,充分混合并在一定時(shí)間內(nèi)使用。
             
              ②不正確的樣本制備
             
              說(shuō)明書(shū)中樣本制備方法已經(jīng)過(guò)性能測(cè)試驗(yàn)證,嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)推薦進(jìn)行。確保使用正確的校正稀釋液。
             
              2.信號(hào)強(qiáng)度增長(zhǎng)不充分
             
              ①底物準(zhǔn)備有誤
             
              解決方案:確保正確的底物體積并混合。如果底物是凍干粉,用相應(yīng)緩沖液重懸*,充分混合并在一定時(shí)間內(nèi)使用。
             
              ②每孔底物添加體積有誤
             
              解決方案:保證移液器正常工作,必要時(shí)進(jìn)行重新校正。保證移液器吸頭連接緊密。
             
              ③孵育時(shí)間或溫度有誤
             
              解決方案:嚴(yán)格按照推薦的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行實(shí)驗(yàn),避免在環(huán)境條件變化的位置孵育96孔板(如放在通風(fēng)處或窗臺(tái)邊)。
             
              ④偶聯(lián)物或底物準(zhǔn)備有誤
             
              解決方案:確保混合相同體積的偶聯(lián)物和底物。加入后會(huì)立即顯色。底物在使用前應(yīng)避光保存。
             
              ⑤儀器設(shè)置不正確
             
              解決方案:確保酶標(biāo)儀使用了正確的濾光片,確保按照說(shuō)明書(shū),正確的配置儀器參數(shù)。
             
              3.邊緣效應(yīng)
             
              ①工作臺(tái)溫度不均衡
             
              解決方案:避免在環(huán)境條件變化的位置孵育,如放在通風(fēng)處或窗臺(tái)邊。
             
              ②體系液體蒸發(fā)
             
              解決方案:保證移液器正常工作,必要時(shí)進(jìn)行重新校正。保證移液器吸頭連接緊密。
             
              ③疊板
             
              孵育時(shí)避免疊板。
             
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