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            天津本生闡述:甘油三酯(TG)檢測試劑盒

            更新時(shí)間:2022-12-13    點(diǎn)擊次數(shù):697

            甘油三酯(TG)檢測試劑盒

            PS1087 甘油三酯(TG)檢測試劑盒 GPO-PAD單試劑微板法 (psaitong)保存條件:-20℃ 避光 6個(gè)月
            產(chǎn)品簡介

            甘油三酯(Triglyceride,TG)又稱三酰甘油,是3分子長鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,是人體內(nèi)含量最多的脂類,大部分組織均可以利用甘油三酯分解產(chǎn)物供給能量,同時(shí)肝臟、脂肪等組織還可以進(jìn)行甘油三酯的合成,用酶學(xué)方法測定  TG 是生化檢測中的常用方法, 其特點(diǎn)是:1、靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度均高;2、使用溫和的反應(yīng)條件;3、操作簡便;4、適用于自動分析儀。
            本公司甘油三脂(TG)檢測試劑盒(GPO-PAP  單試劑微板法)又稱磷酸甘油氧化酶法或磷酸甘油氧化酶-過氧化物酶偶聯(lián)法等,其原理是甘油三脂被 LPL 水解為甘油和脂肪酸,后者經(jīng)甘油激酶和  ATP 磷酸化,G-3-P 被磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化并產(chǎn)生過氧化氫,再經(jīng)過氧化物酶(POD)催化,使 4-氨基安替比林與酚(三者合稱  PAP)反應(yīng),生成紅色benhun醌亞胺(Trinder 反應(yīng)),酶標(biāo)儀在 500~520nm  處進(jìn)行比色測定,用于人或動物的血清、血漿、腦脊液、細(xì)胞、組織等樣本中的甘油三脂含量定量測定。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。

            組分:

            名稱規(guī)格儲存
            試劑(A): GPO-PAP工作液Good's Buffer

            30mL


            -20℃ 避光
            LPL、GK、GPO
            過氧化物酶(POD)
            4-氨基安替比林
            對氯酚
            試劑(B): Glycerol 標(biāo)準(zhǔn)(1.7mmol/L)1mL4℃ 避光
            試劑(C): ddH2O1mLRT


            自備材料:

            1、生理鹽水或PBS。
            2、96 孔板或離心管、小試管。
            3、水浴鍋或恒溫箱。
            4、酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)。
            5、全自動或半自動生化分析儀。


            操作步驟(僅供參考)

            一、樣本處理
            1、血清、血漿、腦脊液樣本:從待測樣本中分離出的血清或血漿不應(yīng)有溶血,直接檢測,如超過線性范圍,用生理鹽水稀釋后檢測。
            2、細(xì)胞樣本
            a:取適量的細(xì)胞(一般推薦>106以上),1000g離心10min,棄上清,留取沉淀。
            b:.用 PBS 或生理鹽水清洗 1-2 次,1000g離心10min,棄上清,留取沉淀。
            c:加入200-300μl   的PBS或生理鹽水勻漿,冰浴條件下超聲破碎細(xì)胞,功率300W,每次3-5s,間隔30s,重復(fù)3-5次;亦可手動勻漿,制備好的勻漿液不可離心;亦可用1-2%  Triton X-100 冰浴 30-60min,制備好的裂解液不可離心。
            3、組織樣本:準(zhǔn)確稱取適量組織樣本,按質(zhì)量(g):生理鹽水或PBS(mL)=1:9的比例,加入生理鹽水或PBS,冰浴條件下手動或機(jī)械勻漿,2500-3000g 離心10min,取上清待用。
            二、酶標(biāo)儀TG測定操作:
            1:按下表依次加入試劑:
            加入物(μL)空白孔標(biāo)準(zhǔn)孔待測孔
            ddH2O3--
            Glycerol 標(biāo)準(zhǔn)(1.7mmol/L)-3-
            待測樣本--3
            GPO-PAP 工作液300300300
            2:充分混勻, 37℃水浴中孵育5min。
            3:酶標(biāo)儀測定 500-520nm 吸光度,以空白孔調(diào)零,讀取標(biāo)準(zhǔn)孔和各待測孔的吸光度。
            三、分光光度計(jì)(1ml 比色杯)、半自動生化分析儀 TG 測定操作:
            1、按下表依次加入試劑:
            加入物(mL)空白管標(biāo)準(zhǔn)管待測管
            ddH2O0.01--
            Glycerol 標(biāo)準(zhǔn)(1.7mmol/L)-0.01-
            待測樣本--0.01
            GPO-PAP 工作液111
            2、充分混勻, 37℃水浴中孵育5min。
            3、分光光度計(jì)測定500-520nm吸光度,空白管調(diào)零,讀取標(biāo)準(zhǔn)管和各待測管的吸光度。
            四、普通分光光度計(jì)(2mL比色杯)TG 測定操作:
            1、按下表依次加入試劑:
            加入物(mL)空白管標(biāo)準(zhǔn)管待測管
            ddH2O0.02--
            Glycerol 標(biāo)準(zhǔn)(1.7mmol/L)-0.02-
            待測樣本--0.02
            GPO-PAP 工作液222
            2、充分混勻, 37℃水浴中孵育5min。
            3、分光光度計(jì)測定500-520nm吸光度,空白管調(diào)零,讀取標(biāo)準(zhǔn)管和各待測管的吸光度。
            五、全自動生化分析儀 TG 測定操作:
            1、按下表依次加入試劑:
            加入物((μL)空白管標(biāo)準(zhǔn)管待測管
            ddH2O3--
            Glycerol 標(biāo)準(zhǔn)(1.7mmol/L)-3-
            待測樣本--3
            GPO-PAP 工作液300300300
            2、充分混勻, 37℃水浴中孵育5min。
            3、全自動生化分析儀測定 500-520nm 波長處吸光度,以空白管調(diào)零,讀取標(biāo)準(zhǔn)管和各待測管的吸光度。


            機(jī)器參數(shù):

            主波長/次波長500/600nm
            反應(yīng)類型終點(diǎn)法
            反應(yīng)方向升反應(yīng)(+)


            計(jì)算公式:

            血清、血漿等液體樣本(空白調(diào)零):
            TG(mmol/L)={(待測管吸光度-空白吸光度)/(標(biāo)準(zhǔn)管吸光度-空白吸光度)}×1.7mmol/L
            血清、血漿等液體樣本(全自動生化分析儀):
            TGmmol/L)=(待測管吸光度/(標(biāo)準(zhǔn)管吸光度)×1.7mmol/L
            細(xì)胞、組織等樣本(空白調(diào)零):
            TG(mmol/L)={ ( 待 測 管 吸 光 度 - 空 白 吸 光 度 )/( 標(biāo) 準(zhǔn) 管 吸 光 度 -空 白 吸 光 度 ) }×1.7mmol/L÷待測樣本濃度(mg/mL)
            細(xì)胞、組織等樣本(全自動生化分析儀):
            TG(mmol/L)=(待測管吸光度/(標(biāo)準(zhǔn)管吸光度)×1.7mmol/L÷待測樣本濃度(mg/mL)


            參考區(qū)間:

            健康成年人:
            理想范圍:<1.7mmol/L(<150mg/dl)
            邊緣升高:<1.7-2.25mmol/L(150-199mg/dl)
            升高:<2.26-5.64mmol/L(200-499mg/dl)
            很高:≥565mmol/L(500mg/dl)


            性能指標(biāo):

            外觀無色至淡黃色澄清液體
            線性范圍0.05-9.0mmol/L(4~790mg/dl),R2>0.98
            靈敏度檢測下限 0.05mmol/L(4mg/dl)
            變異系數(shù)批內(nèi)<5%,批間<8%,總誤差<10%
            空白吸光值 <0.2(1cm 光徑)
            干擾因素膽紅素<205μmol/L;血紅蛋白<6g/L;EDTA、肝素抗凝時(shí),對結(jié)果無明顯影響。
            穩(wěn)定性密閉,6個(gè)月


            注意事項(xiàng):

            1、上述低溫試劑避免反復(fù)凍融,以免失效或效率下降。
            2、本法可直接用于檢測腦脊液中的TG含量,但不能直接檢測尿液中的TG含量,因?yàn)槲唇?jīng)處理的尿液中含有還原性物質(zhì),影響過氧化物酶反應(yīng)。
            3、待測樣本如不能及時(shí)測定,應(yīng)置于2-8℃保存,3天內(nèi)穩(wěn)定。
            4、本法線性范圍可達(dá)9.0mmol/L,如果樣本TG濃度過高,結(jié)果可能呈假性降低,應(yīng)用生理鹽水稀釋后重測,結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。


            有效期:-20℃ 避光, 6個(gè)月有效。





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